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詞條說明
生物緩沖劑該如何選擇,它們的這些優(yōu)缺點你都了解嗎?
如何選擇緩沖劑? 選擇緩沖體系,其解離常數(shù)pKa值應該在設定的pH上下一個pH值單位內(nèi),因為緩沖液的pKa變化超過一個pH單位時,其緩沖能力就會明顯下降; 緩沖體系不應影響蛋白質(zhì)的活性或者DNA的穩(wěn)定性,并避免其他離子的干擾; 另外,還要考慮溫度的影響:溫度不僅對緩沖液有影響,對細胞也有影響,大多數(shù)動物細胞在37℃的生理狀況下pH為7.0~7.5,而在溫度下降到0℃時可達到8.0。 一、磷酸鹽緩沖
三羥甲基氨基甲烷緩沖液,即Tris緩沖液,通常搭配鹽酸來調(diào)節(jié)pH值配制緩沖劑,也有的是用醋酸、硼酸、甘氨酸等其它酸調(diào)節(jié),而很多其它種類的緩沖劑如Bicine、MOPS、HEPES、CAPS等都是用氫氧化鈉堿液來調(diào)節(jié)pH,這是Tris緩沖液的獨特之處。 三羥甲基氨基甲烷基礎性質(zhì) Tris在室溫(25℃下,它的pKa為8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。 Tri
HEPES HEPES是兩性離子Good's緩沖液,在6.8至8.2的pH范圍內(nèi)有效。這使HEPES在生理pH值下成為有效的緩沖液。該緩沖液可用于多種生物的細胞培養(yǎng)基中。它也可用作蛋白質(zhì)研究中的結(jié)合緩沖液,用于陽離子交換洗脫實驗中,以及在凝膠電泳中用作運行緩沖液。 HEPES的制備步驟: 要制備1升1M HEPES緩沖溶液,請將238.30 g HEPES溶解 在750 mL水中。使用10N氫氧化
什么是化學發(fā)光? 化學發(fā)光:在常溫下由化學反應產(chǎn)生的光,產(chǎn)生電子能級處于激發(fā)態(tài)的物質(zhì),后者通過躍遷釋放能量產(chǎn)生光子,從而導至的發(fā)光現(xiàn)象。化學發(fā)光是一個多步驟的過程。 化學發(fā)光按照發(fā)光時間可分為: 閃光(Flash): 發(fā)光時間在數(shù)秒內(nèi),如吖啶酯,以原位進樣和時間積分法測量。 輝光(Glow): 發(fā)光時間在數(shù)十分鐘以上,如:HRP-Luminol系統(tǒng)、AP-AMPPD系統(tǒng)、黃嘌呤氧化酶系統(tǒng),無須原位
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