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有效轉(zhuǎn)移蛋白質(zhì),您需知道以下緩沖液的配置技巧
將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固體支持物是蛋白質(zhì)印跡的關(guān)鍵步驟。盡管這是一個簡單的過程,但仍需要一定程度的優(yōu)化,具體取決于蛋白質(zhì)的大小和凝膠的化學(xué)性質(zhì)。在這里,我們提供了一些技巧,可以有效地將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。 1.根據(jù)蛋白質(zhì)調(diào)整緩沖液 無論您是使用現(xiàn)有的實驗室方案還是出版物中的方案,都可能需要根據(jù)目標(biāo)蛋白重新校準(zhǔn)緩沖液配方。您可以將Towbin轉(zhuǎn)移緩沖液(25 mM Tris,192 mM甘氨酸,p
在世界經(jīng)合組織國家中,最大的體外診斷試劑市場為北美地區(qū),2010年北美市場發(fā)賣額為184.5億美元,到2012年增長到220億美元;而西歐市場2010年為137億美元,到2012年達到150億美元。 經(jīng)過20多年的成長,診斷試劑前后履歷了化學(xué)、酶、免疫測定和探針手藝4次手藝革命。隨著生物醫(yī)藥科技的突飛猛進以及全數(shù)診斷試劑財產(chǎn)的攻破和成長,這一切無疑將給遭遇各類疾病熬煎的患者帶來更多的新賭氣會。每次
Hepes是一種通用的兩性離子緩沖劑,不結(jié)合鎂,鈣,錳或銅離子。其中細胞培養(yǎng)應(yīng)用的緩沖液強度通常在10至25mm之間,在加入Hepes后,用NaOH或HCl調(diào)節(jié)pH。必須注意保持培養(yǎng)基中的重量克分子滲透壓濃度,并且需要評估對于給定細胞系的毒性。根據(jù)文獻得到,HEPES在控制pH方面優(yōu)于碳酸氫鈉。 Hepes的緩沖液可以通過好幾種方法來制備,可以將游離酸添加到水中,然后用大約一半摩爾當(dāng)量的氫氧化鈉或
Tris中文品名為三羥甲基氨基甲烷;氨基丁三醇;緩血酸胺;2-氨基-2-(羥甲基)-1,3-丙二醇。是一種白色結(jié)晶或粉末。溶于乙醇和水,微溶于乙酸乙酯、苯,不溶于乙mi、四氯化碳,對銅、鋁有腐蝕作用,有刺激性的化學(xué)物質(zhì)。 Tris為弱堿,在25℃下,它的pKa為8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。Tris堿的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調(diào)節(jié)pH值
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